相差顯微鏡

相差顯微鏡定義

• 未染色的活細胞幾乎不吸收光。光吸收差會導致圖像強度分布的差異非常小。這使得細胞在明場顯微鏡中幾乎看不到或根本看不到。相差顯微鏡是一種光學顯微鏡技術(shù)，可將穿過透明標本的光的相移轉(zhuǎn)換為圖像中的亮度變化。
• 它是1934年由荷蘭物理學家Frits Zernikeshou次描述的。

相差顯微鏡原理

當光穿過細胞時，會發(fā)生小的相移，這是人眼看不見的。在相襯顯微鏡中，這些相移被轉(zhuǎn)換為幅度變化，可以觀察到圖像對比度的差異。

相差顯微鏡的工作

1. 鎢-鹵素燈產(chǎn)生的部分相干照明被引導通過一個集光鏡，并聚焦在位于子級聚光鏡前焦平面上的專用環(huán)空（標記為聚光鏡環(huán)空）上。
2. 穿過環(huán)形空間的波前照亮了樣本，并且未偏移或通過樣本中存在的結(jié)構(gòu)和相位梯度而被相位衍射和延遲。
3. 由物鏡收集的未衍射和衍射光在后焦平面被相位板隔離，并聚焦在中間像平面上，從而形成在目鏡中觀察到的zui終相襯像。